Il
terreno colturale SIH Medium, messo a punto da Hanh, Friehs e
Flaschel (2004), rappresenta il passo successivo per lo sviluppo di
terreni sintetici dedicati alla coltivazione di D.discoideum con grandi densità cellulari.
Il
SIH Medium è la versione migliorata del FM Medium, come è
stato creato da Frank e Kessin (1977).
La
principale differenza tra SIH ed FM è l’aggiunta dell’acido
aspartico (1,1 mM) insieme all’aumento delle concentrazioni di
lisina (8,5 mM) e di triptofano (1,7mM). Sono state pure lievemente
incrementate nel terreno SIH le concentrazioni di cisteina, acido
glutammico, metionina, fenilalanina, treonina
Le
modifiche di composizione degli aminoacidi nel terreno colturale
SIH ne hanno migliorato di molto l’utilizzazione. La densità
di cellule di D.discoideum è aumentata fino a oltre 5x107 cellule rispetto alle densità di 3 x 107 cellule
ottenibili sul substrato FM.
Rif.:
Improvement
of a synthetic medium for D.discoideum. Sang-In Han, Karl Friehs and
Erwin Flaschel Process Biochemistry , 39 (8), 925 – 930, 2004.
Cultivation
of on an improved synthetic medium in a conventional bioreactor.
Sang-In Han, Karl Friehs and Erwin Flaschel Process Biochemistry ,
39 585 – 589, 2004.
Codice |
formato |
formula |
mg/l |
SIH0101 |
250g |
Amino
acids |
|
SIH0102 |
1
kg |
Arg |
700 |
SIH0103 |
6
x 1 kg |
Asp |
300 |
|
|
Asp
A |
150 |
|
|
Cys |
300 |
|
|
GluA |
545 |
|
|
Gly |
900 |
|
|
His |
300 |
|
|
Ile |
600 |
|
|
Leu |
900 |
|
|
Lys |
1250 |
|
|
Met |
350 |
|
|
Phe |
550 |
|
|
Pro |
800 |
|
|
Thr |
500 |
|
|
Trp |
350 |
|
|
Val |
700 |
|
|
Vitamins |
|
|
|
Biotin |
0,02 |
|
|
Cyanocobalamin |
0,01 |
|
|
Folic
acid |
0,2 |
|
|
Lipoic
acid |
0,4 |
|
|
Riboflavin |
0,5 |
|
|
Thiamine |
0,6 |
|
|
Micro
elements |
|
|
|
Na2EDTA.2H2O |
4,84 |
|
|
ZnSO4 |
2,3 |
|
|
H3BO3 |
1,11 |
|
|
MnCl2.4H2O |
0,51 |
|
|
CoCl2.6H2O |
0,17 |
|
|
CuSO4.5H2O |
0,15 |
|
|
(NH4)6Mo7O24.4H2O |
0,1 |
|
|
Minerals |
53,5 |
|
|
NH4Cl |
|
|
|
CaCl2.2H2O |
2,94 |
|
|
FeCl3 |
16,2 |
|
|
MgCl2.6H2O |
81,32 |
|
|
KH2PO4 |
870 |
|
|
Carbon
source |
|
|
|
Glucose |
10000 |
|
|
Total |
20326 |
Sciogliere
20,3 g di terreno in 1 litro di acqua distillata.
Conservare
all’asciutto a temperatura ambientale.
R:
36/37/38 S: 26,36
|
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